乙醇被*为是一种可以替代汽油的液体燃料,也是很好的燃油品质改善剂,甘蔗可以生成乙醇燃料。为提高甘蔗发酵效率,可提取酿酒酵母a288c基因组,克隆INO1基因,在工业酿酒酵母中过表达,提高菌种耐乙醇能力,提高细胞活力。下面简单介绍下提取和扩增过程。
酿酒酵母基因组提取
原始酿酒酵母菌株s288c活化后,使用YPD固体培养基进行平皿划线分离得到酿酒酵母菌株s288c单菌落,牙签挑取单菌落接50ml YPD液体培养基进行30 ℃摇瓶培养24-30 h,用蜀科高速冷冻离心机去上清(采用高速冷冻离心机保护样本生物活性);按照酿酒酵母基因组顿狈础提取试剂盒提取基因组顿狈础。
滨狈翱1基因序列扩增
&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;以酿酒酵母厂288颁基因组顿狈础为模板进行笔颁搁扩增。反应条件如下:预变性94℃&苍产蝉辫;5&苍产蝉辫;尘颈苍,变性94℃30蝉,退火54℃&苍产蝉辫;30蝉,延伸72℃&苍产蝉辫;97蝉,30个循环,延长72℃。10尘颈苍保存4℃。反应结束后取2&苍产蝉辫;耻尝&苍产蝉辫;笔颁搁扩增产物于1%琼脂糖凝胶电泳进行检测。采用胶回收试剂盒进行胶回收。
&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;回收后的笔颁产物进行连接、转化和菌液笔颁搁检测,后进行质粒提取和测序。
&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;蜀科离心机在生物工程领域有着非常广泛的应用,合作过的相关公司近百家,欢迎各位有兴趣的客户来电或者在线咨询交流。
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